B028094 - INGEGNERIA GENETICA

Italiano (materiale didattico in lingua inglese)

Enzimi di restrizione e modificazione. La PCR e le sue varianti. Sequenziamento del DNA. Ibridazione del DNA. Vettori genici. Geni reporter. Library geniche/genomiche. Produzione di proteine eterologhe. Metodi di studio dell’espressione genica. Metodi di studio della metilazione del DNA. Metodi di studio dell’interazione proteine-DNA. Metodi di studio del polimorfismo genico. Manipolazione genica di organismi. Tecniche per OGM. Mutagenesi diretta. CRISPR. Biologia sintetica

• Articoli scientifici e approfondimenti suggeriti a lezione
• Primrose, Twiman e Bold Ingegneria Genetica - Principi e Tecniche. Zanichelli editore
• Brown Biotecnologie molecolari- Principi e tecniche Zanichelli editore
• Mengoni, Scialpi La PCR e le sue varianti. FUP

Conoscenze:
Basi concettuali e tecniche nell'ambito delle tecniche del DNA ricombinante e possibilità di applicazione nelle aree della ricerca di base ed applicata

Competenze acquisite:
Saper progettare esperimenti di manipolazione e di studio del DNA per scopi di ricerca di base ed applicata

Capacità acquisite al termine del corso:
Identificare e scegliere la tecnica più opportuna in diverse situazioni/casi studio

Corsi vincolanti: nessuno
Corsi raccomandati: Genetica, Biologia Molecolare

CFU: 6
Numero di ore totali del corso: 150 (= 6 x 25)
Numero di ore per studio personale e altre attività formative di tipo individuale: 102
Numero di ore relative alle attività in aula: 48
Numero di ore relative ad attività di laboratorio (lezioni in laboratorio):
Numero di ore relative ad attività di esercitazioni (in laboratorio e in campo): 0
Numero di ore relative ad attività seminariali: 0
Numero di ore relative ad attività di stage: 0
Numero di ore per prove in itinere: 0

Orario di ricevimento
Su appuntamento dal lunedì al venerdì
Strumenti a supporto della didattica: Materiale didattico integrativo verrà fornito durante le lezioni e mediante la piattaforma Moodleì

Verifica delle conoscenze e delle competenze (problem solving) mediante test scritto con domande a risposta chiusa ed aperta della durata di 1 h.

Gli strumenti di base
Gli strumenti e le tecniche: enzimi di restrizione e modificazione.
La PCR e le sue varianti
Sequenziamento del DNA. Metodo Sanger e metodi NGS (cenni)
Ibridazione del DNA
Vettori genici. Geni reporter (GFP, lux, lacZ)
Library geniche/genomiche e screening
I sistemi TA, Gateway e pJET
Produzione di proteine eterologhe

I metodi di indagine
Metodi di studio dell’espressione genica (cDNA, microarrays, RNA-Seq)
Metodi di studio della metilazione del DNA (bisolfito, isoschizomeri)
Metodi di studio dell’interazione proteine-DNA (ChIP, EMSA, DNase protection)
Metodi di studio del polimorfismo genico (PCR-based, SSR, SNP, microarrays, sequenziamento, RAD)

La manipolazione del genoma
Manipolazione genica di organismi. Tecniche per OGM.
Mutagenesi diretta e alterazione dell’espressione (RNAi). CRISPR
Biologia sintetica