Apprendimento dei principi di microscopia utili al biologo per lo studio della materia vivente fino alle tecniche più avanzate di imaging funzionale in vivo. Apprendimento dei concetti base delle tecniche ottiche e approfondimento delle tecniche di marcatura strutturale e funzionale.
Metodi Didattici
Lezioni frontali
Modalità di verifica apprendimento
Esame orale
Programma del corso
La luce e le sue caratteristiche. Scattering, rifrazione, lenti, ingrandimento e risoluzione. Metodi di contrasto in microscopia: metodi di illuminazione e di marcatura. La fluorescenza. I cromofori organici e le proteine fluorescenti. Sensori basati sulla fluorescenza per la misurazione di parametri chimico-fisici di interesse biologico. I microscopi: campo largo, confocale, due fotoni. Caratteristiche, rivelatori e modalità di imaging. Risoluzione spaziale in 3D e risoluzione temporale. Metodi ottici perturbativi per il controllo delle funzioni cellulari: optogenetica, ablazione laser, nanodissezione, uncaging. Applicazioni alle neuroscienze: i modelli animali e lo studio delle basi neuronali del comportamento, freely-behaving imaging e affini. Superare il limite di Abbe: la microscopia in super-risoluzione. La microscopia elettronica e i metodi di ricostruzione ultrastrutturale 3D. Analisi di immagini.